Апісанне метаду предимплантационной генетычнай дыягностыкі (ПГД): асаблівасці і наступствы

Метад предимплантационной генетычнай дыягностыкі выкарыстоўваецца для ацэнкі стану здароўя эмбрыёна, атрыманага пры экстракарпаральнае апладненне перад яго імплантацыяй ў паражніну маткі. Спосаб дазваляе не толькі выбраць здаровага будучага малога, але і павялічыць шанец наступлення цяжарнасці. Методыка шырока выкарыстоўваецца ва ўсіх сусветных клініках, якія займаюцца экстракарпаральнага апладнення.

агульныя паняцці

Предимплантационная генетычная дыягностыка дазваляе правесці комплекснае абследаванне і выключыць наяўнасць хромосомных анамалій ў цэлым або нейкага аднаго канкрэтнага адхіленні. У апошні час паралельна з раннімі заганамі праводзіцца скрынінг генаў, якія могуць правакаваць ўзнікненне пухлін ў дарослым узросце (яечнікаў, кішачніка, грудзей).

У выпадку носьбіцтва геномных захворванняў з боку маці праводзіцца біяпсія некалькіх палярных цяля яйкаклеткі яшчэ да правядзення апладнення. Апісаныя спосабы з'яўляюцца альтэрнатывай ранняй прэнатальнай дыягностыцы, што дазваляе перасцерагчы ад перапыненняў цяжарнасці, калі раптам плод будзе мець генетычныя паталогіі.

Предимплантационная генетычная дыягностыка дазваляе вызначыць пол будучага маляняці ўжо ў працэсе правядзення скрынінга. Гэта выкарыстоўваецца для папярэджання развіцця анамалій, счэпленых з палавой прыналежнасцю.

Як перадаюцца па спадчыне генетычныя захворванні

Адрозніваюць спадчынныя паталогіі, якія ўзніклі па дамінантным, рецессивному і х-счапленне тыпу.

Каму праводзяць скрынінг?

Предимплантационная генетычная дыягностыка (ПГД) праводзіцца ў наступных выпадках:

1. Наяўнасць у адной або абедзвюх з сямейнай пары спадчынных хвароб або змяненняў карыатыпе. Часта партнёры самі ведаюць пра свае праблемы, радзей - пазнаюць у працэсе скрынінга.
2. Звыклае невыношвання цяжарнасці. Праблемай падобнага служаць ня анамаліі з боку бацькоў (іх можа зусім не быць), а генетычныя мутацыі плёну, якія выклікаюць выкідкі.
3. Ўзрост асоб, якія праходзяць праграму ЭКА, больш за 38 гадоў.
4. Больш за 3 няўдалых спробаў экстракарпаральнага апладнення ў анамнезе.
5. Мужчынскае бясплоддзе.
6. Ўключэнне ИКСИ (интрацитоплазматическая ін'екцыя народка) у праграму апладнення. Працэс багаты развіццём генетычных адхіленняў у эмбрыёна.
7. Выпадкі пузырного заносу ў анамнезе.

асаблівасці ПГД

Даследаванні ў сферы предимплантационной генетычнай дыягностыкі сведчаць аб тым, што метад мае права існаваць, дапамагае дыягнаставаць і папярэджваць храмасомныя анамаліі, аднак, патрабуе далейшага ўдасканалення.

Асаблівасці ПГД заключаюцца ў наступным:

• частата невыношвання пры скрынінг ніжэй, чым без яго;
• на дадзены момант адсутнічаюць доказы таго, што павялічваецца магчымасць наступлення цяжарнасці;
• існуе магчымасць ілжывага выніку: эмбрыён здаровы, а вынік паказвае адхіленні, эмбрыён хворы, а даследаванне кажа пра адваротнае (5-10% выпадкаў).

Правядзенне предимплантационной генетычнай дыягностыкі (абследаванне бластомеров)

Пасля пагаднення на экстракарпаральнае апладненне репродуктолог ацэньвае неабходнасць правядзення ПГД шлюбнай пары. У выпадку наяўнасці паказанняў партнёры могуць пагадзіць або адмовіцца ад працэдуры. Далей падпісваецца дакумент, які пацвярджае дазвол на правядзенне абследавання.

На трэці дзень з моманту апладнення эмбрыёна генетык бярэ адну са сфармаваных клетак-бластомеров для аналізу. Лічыцца, што для плёну гэта не мае наступстваў, паколькі ўсе клеткі ўзаемазаменныя.

Спецыяліст праводзіць даследаванне па адным з выбраных раней напрамкаў: вывучэнне будовы клеткі пад адмысловым флуарэсцэнтным мікраскопам, даследаванне ДНК, выкарыстоўваючы метад палімеразнай ланцуговай рэакцыі, каб вызначыць наяўнасць мутацыі.

Зыходзячы з выніку, эмбрыёны, якія маюць анамаліі, не будуць выкарыстоўвацца ў працэсе імплантацыі. Выбіраюцца здаровыя і якасныя. Далей аднаго з іх або некалькі пераносяць у паражніну маткі маці.

Пры біяпсіі палярнага цяля адбываецца абследаванне хромосомного набору маці. Праводзіцца яна ў тым выпадку, калі па жаночай лініі выяўлена наяўнасць генетычна абумоўленай паталогіі. Працэдура дазваляе вызначыць, ці здаровая яйкаклетка, якая будзе выкарыстоўвацца для апладнення, не парушыўшы яе структуры. Калі анамаліі не выяўлены, то яе можна выкарыстоўваць для апладнення і пераносу ў паражніну маткі.

Існуюць выпадкі, калі праводзіцца скрынінг палярных цяля, а затым ужо бластомеров. Гэта дазваляе атрымаць больш дакладны вынік. Схему, па якой будзе праходзіць абследаванне, выбірае спецыяліст-генетык.

выкарыстоўваюцца метады

Лікавыя і структурныя парушэнні храмасом вызначаюць метадам флуоресцентной гібрыдызацыі. Гэты метад дазваляе ўдакладніць паслядоўнасць ДНК клеткі. Выкарыстоўваюцца спецыяльныя ДНК-зонды, якія па сваёй структуры з'яўляюцца Камплементарнай ўчасткамі для зон ДНК бластомера.

Зонд мае ў складзе нуклеатыд і флуорофор (малекулу, здольную да флуарэсцэнцыі). Пасля ўзаемадзеяння ДНК-мішэні з ДНК-зондам утвараюцца падсвечаныя ўчасткі, якія праглядаюцца пад флуарэсцэнтным мікраскопам.

Таксама выкарыстоўваюць метад ПЦР (палімеразнай ланцуговай рэакцыі). Ён заключаецца ў капіяванні ўчастка ДНК пры дапамозе ферментаў у пэўных лабараторных умовах.

дыягностыка анеуплоідаў

Гэта адзін з метадаў предимплантационной генетычнай дыягностыкі, які дазваляе выявіць наяўнасць лікавых хромосомных анамалій (вызначыць лішнія або адсутныя храмасомы).

Генетычны матэрыял складаецца з 46 храмасом, палову з якіх аддае бацька, а другую палову - маці. Калі эмбрыён атрымлівае лішнюю храмасому, гэта называецца трисомией, а страта якой-небудзь - моносомией. Гэтыя дэфекты могуць прыводзіць да наступстваў:

• адсутнасць імплантацыі эмбрыёна;
• самаадвольнае перапыненне цяжарнасці;
• спадчынныя паталогіі (сіндром Дауна, Клайнфельтера, Шерешевского-Тэрнера).

Мужчынскае бясплоддзе і ўзрост сямейнай пары з'яўляюцца частымі фактарамі развіцця падобных анамалій.

ПГД моногенных паталогій

Предимплантационная генетычная дыягностыка эмбрыёнаў з мэтай вызначыць наяўнасць моногенных захворванняў праводзіцца ў сем'ях, дзе ўстаноўлена наяўнасць спадчынных анамалій. Калі ў сямейнай пары ўжо ёсць маляня з гамагенным захворваннем, то магчымасць нарадзіць яшчэ аднаго хворага дзіцяці падвышаецца ў некалькі разоў.

Прычынай з'яўляецца парушэнне паслядоўнасці храмасом на пэўным участку ДНК. Да падобных захворванняў ставяцца:

• муковісцідоз;
• адреногенитальный сіндром;
• фенілкетанурыя;
• гемафілія;
• серповидноклеточная анемія;
• сіндром Вернига-Хоффмана.

Перавагі і рызыка метаду

Предимплантационная генетычная дыягностыка, водгукі аб якой лічацца двухсэнсоўнымі, мае пэўныя перавагі ў сферы прэнатальнага скрынінга:

• у матку пераносяцца толькі якасныя і здаровыя эмбрыёны;
• памяншаецца рызыка нараджэння дзіцяці з генетычнымі адхіленнямі;
• удвая зніжаецца рызыка невыношвання;
• удвая зніжаецца рызыка шматплоднымі;
• на 10% павялічваецца шанец імплантацыі эмбрыёна;
• на 20% павялічваецца шанец на шчаслівае нараджэнне малога.

Рызыка неспадзяванага пашкоджанні эмбрыёна пры ПГД роўны 1%. Верагоднасць памылковага выніку - 1:10, акрамя таго, 3% магчымасці таго, што эмбрыён з якой-небудзь анамаліяй будзе ацэнены як здаровы.

Верагоднасць, што здаровы эмбрыён будзе па выніках мець адхіленні - 1:10. Шанец 1: 5, што перанос эмбрыёнаў у паражніну маткі будзе адменены па прычыне знойдзеных анамалій ў кожным з іх.

супрацьпаказанні

Предимплантационная генетычная дыягностыка (ПГД), наступствы якой для эмбрыёна дакладна не выяўлены, мае шэраг супрацьпаказанняў да правядзення:

• фрагментацыя эмбрыёна больш за 30% (нормай лічыцца адукацыю фрагментаў да 25%);
• наяўнасць шмат'ядравых бластомеров ў эмбрыёна;
• эмбрыён мае менш 6 бластомеров на трэці дзень свайго развіцця.

бяспека метаду

Дыягностыка праводзіцца на раннім этапе стварэння будучага арганізма, калі ўсе яго клеткі з'яўляюцца полипотентными, гэта значыць з кожнай можа сфармавацца паўнавартасны здаровы арганізм.

Усе якія праводзяцца этапы ПГД ня наносяць час эмбрыёна, плёну і будучаму маляню. Пасля таго як узор для даследавання атрыманы, яго падрыхтоўваюць адмысловым чынам. Клеткі змяшчаюцца на прадметнае шкло, на якім фіксуюцца, або ў буферны раствор.

Кошт працэдуры

Предимплантационная генетычная дыягностыка, кошт якой вар'іруецца ад 50 да 120 тысяч рублёў, на першы погляд, здаецца дарагой маніпуляцыяй. Аднак здароўе і лячэнне дзіцяці з генетычна абумоўленымі паталогіямі абыйдзецца значна больш.

Працэдура дае ўсе перавагі перад жанчынамі, якія змаглі зачаць дзіця натуральным шляхам, паколькі ім такі метад дыягностыкі недаступны. Предимплантационная генетычная дыягностыка, цана якой мізэрная ў параўнанні з самім экстракарпаральнага апладнення, служыць толькі дадаткам да агульнай праграме, якая дазваляе не толькі выносіць і нарадзіць, але і вырасціць здаровага маляняці.